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上海希言科學(xué)儀器有限公司
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磁珠法蛋白純化越來越受到很多科研小伙伴的青睞，使用磁珠純化方法比填料柱方法操作更加便捷、磁珠的載量更高、獲取的蛋白純度更高。在磁珠法蛋白純化被逐漸接受的同時(shí)，有的用戶由于剛接觸磁珠法蛋白純化，對于磁珠法的原理、性能不熟悉，導(dǎo)致純化過程中遇到些問題，今天小編就用戶使用磁珠過程中經(jīng)常遇到的問題，科普一番，開啟我們探究磁珠法蛋白純化失敗的真相之旅！His-tag蛋白純化磁珠原理His-tag蛋白純化磁珠是在瓊脂糖微球的內(nèi)部填充磁性內(nèi)核，在表面固定金屬離子Ni2+或Co2+，Ni2+或Co2+可以和蛋白
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PCR標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系及反應(yīng)條件
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系：10×擴(kuò)增緩沖液10ul4種dNTP混合物各200umol/L引物各10～100pmol模板DNA0.1～2ugTaqDNA聚合酶2.5uMg2+1.5mmol/L加雙或三蒸水至100ulPCR反應(yīng)五要素：參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。 -
加熱型磁力攪拌器主要應(yīng)用于化學(xué)合成、分析化學(xué)和生命科學(xué)領(lǐng)域。對于加熱功能，客戶往往比較關(guān)注的加熱速度、控制溫度過沖和維持溫度穩(wěn)定性的能力，但加熱速度和控制溫度過沖是一對不可調(diào)和的矛盾，尤其是在開放的環(huán)境中針對不同介質(zhì)、不同體積的應(yīng)用，這對矛盾顯得更加難以平衡。為了能夠適應(yīng)更多客戶不同應(yīng)用的需求，的該類產(chǎn)品生產(chǎn)商都采用了類似的折中的控制方法------允許*次達(dá)到目標(biāo)溫度時(shí)有一定程度的溫度過沖，之后不再允許有任何大幅度溫度過沖，并且盡快形成只在目標(biāo)溫度附近非常小的震蕩（如圖1所示），這也必然導(dǎo)致了
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1．使用合適的吸頭為確保更好的準(zhǔn)確性和精度，建議移液量在吸頭的35％-100％量程范圍內(nèi)。2．吸頭的安裝對于大多數(shù)移液器，特別是多道移液器，安裝吸頭并非易事：為追求良好的密封性，需要將移液套柄插入吸頭后，左右轉(zhuǎn)動(dòng)或前后搖動(dòng)用力上緊。也有人會(huì)用移液器反復(fù)撞擊吸頭來上緊，但這樣操作會(huì)導(dǎo)致吸頭變形而影響精度，嚴(yán)重的則會(huì)損壞移液器，所以應(yīng)當(dāng)避免出現(xiàn)這樣的操作。3．吸頭浸入角度和深度吸頭浸入角度控制在傾斜20度之內(nèi)，保持豎直為佳；吸頭浸入深度建議如下所示：移液器規(guī)格吸頭浸入深度2µL和10µL1mm20µ
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過濾器待處理的水由入水口進(jìn)入機(jī)體，水中的雜質(zhì)沉積在不銹鋼濾網(wǎng)上，由此產(chǎn)生壓差。通過壓差開關(guān)監(jiān)測進(jìn)出水口壓差變化，當(dāng)壓差達(dá)到設(shè)定值時(shí)，電控器給水力控制閥、驅(qū)動(dòng)電機(jī)信號(hào)，引發(fā)下列動(dòng)作：電動(dòng)機(jī)帶動(dòng)刷子旋轉(zhuǎn)，對濾芯進(jìn)行清洗，同時(shí)控制閥打開進(jìn)行排污，整個(gè)清洗過程只需持續(xù)數(shù)十秒鐘，當(dāng)清洗結(jié)束時(shí)，關(guān)閉控制閥，電機(jī)停止轉(zhuǎn)動(dòng)，系統(tǒng)恢復(fù)至其初始狀態(tài)，開始進(jìn)入下一個(gè)過濾工序。設(shè)備安裝后，由技術(shù)人員進(jìn)行調(diào)試，設(shè)定過濾時(shí)間和清洗轉(zhuǎn)換時(shí)間，待處理的水由入水口進(jìn)入機(jī)體，過濾器開始正常工作，當(dāng)達(dá)到預(yù)設(shè)清洗時(shí)間時(shí)，電控器給水力控
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在分析實(shí)驗(yàn)室中使儀器處于良好的狀態(tài)是很重要的。有規(guī)律的日常維護(hù)能夠確保儀器處于*的運(yùn)行狀態(tài)。如何維護(hù)原子吸收光譜儀，維護(hù)應(yīng)包括以下四個(gè)重要方面：1．普通的儀器維護(hù)2．使用的氣體的維護(hù)3．火焰組件的維護(hù)4．石墨平臺(tái)組件的維護(hù)日常維護(hù)的優(yōu)點(diǎn)有以下幾點(diǎn)：l延長儀器壽命l減少停機(jī)時(shí)間l*儀器性能；增加分析人員對數(shù)據(jù)結(jié)果正確性的信心。如何維護(hù)原子吸收光譜儀普通的儀器維護(hù)灰塵和露水會(huì)在儀器表面積累，腐蝕性液體可能會(huì)濺到儀器上。為了降低危害，可以用蘸有水或中性洗滌劑的軟布擦拭儀器。嚴(yán)禁使用有機(jī)溶劑。樣品艙的光
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一、防止RNA酶污染的措施1.所有的玻璃器皿均應(yīng)在使用前于180℃的高溫下干烤6hr或更長時(shí)間。2.塑料器皿可用0.1%DEPC水浸泡或用lv仿沖洗（注意：有機(jī)玻璃器具因可被lv仿腐蝕，故不能使用）。3.有機(jī)玻璃的電泳槽等，可先用去污劑洗滌，雙蒸水沖洗，乙醇干燥，再浸泡在3%H2O2室溫10min，然后用0.1%DEPC水沖洗，晾干。4.配制的溶液應(yīng)盡可能的用0.1%DEPC，在37℃處理12hr以上。然后用高壓滅菌除去殘留的DEPC。不能高壓滅菌的試劑，應(yīng)當(dāng)用DEPC處理過的無菌雙蒸水配制，然
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流式細(xì)胞術(shù)的實(shí)驗(yàn)檢測對象是單細(xì)胞懸液，因此，在組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)中欲對待測樣品細(xì)胞進(jìn)行分類計(jì)數(shù)，也需把樣品制備成細(xì)胞懸液，并要求被檢細(xì)胞大小為0.2～80pm，每個(gè)樣品中至少有20000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞濃度為105～107個(gè)／ml。制備成的單細(xì)胞懸液經(jīng)熒光或免疫熒光標(biāo)記即可上機(jī)檢測。一．單層培養(yǎng)細(xì)胞單細(xì)胞懸液的制備1.棄去培養(yǎng)細(xì)胞(對數(shù)生*)中的舊培養(yǎng)液，加入1～2ml0.25％*，倒置顯微鏡下觀察，見細(xì)胞稍變圓時(shí)，停止*作用。也可直接觀察培養(yǎng)瓶，靜置消化2～3分鐘，待細(xì)胞逐漸變白，有脫落趨
