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在實(shí)驗(yàn)過程中，由于樣品的各種性質(zhì)差異，只有選擇了正確的離心方法，才能獲得預(yù)期的分離純化結(jié)果。常用的離心方法主要有差速離心法、密度梯度離心法。其中密度梯度離心法又可細(xì)分為速率區(qū)帶離心和等密度梯度離心法。離心方法——差速離心差速離心法(differebtialvelocitycentrifugationmethod)又稱離心力差分離法。原理是利用樣品中各組分沉降系數(shù)的差異，對不同的微粒施以不同的離心力，經(jīng)過多次離心，離心速度逐步加大，將不同的微粒依次沉降，從而實(shí)現(xiàn)離心分離。如果分離樣品中有大中小三種
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超聲波提取技術(shù)超聲波是指頻率為20千赫～50兆赫左右的電磁波，它是一種機(jī)械波，需要能量載體—介質(zhì)—來進(jìn)行傳播。超聲波在傳遞過程中存在著的正負(fù)壓強(qiáng)交變周期，在正相位時，對介質(zhì)分子產(chǎn)生擠壓，增加介質(zhì)原來的密度；負(fù)相位時，介質(zhì)分子稀疏、離散，介質(zhì)密度減小。也就是說，超聲波并不能使樣品內(nèi)的分子產(chǎn)生極化，而是在溶劑和樣品之間產(chǎn)生聲波空化作用，導(dǎo)致溶液內(nèi)氣泡的形成、增長和爆破壓縮，從而使固體樣品分散，增大樣品與萃取溶劑之間的接觸面積，提高目標(biāo)物從固相轉(zhuǎn)移到液相的傳質(zhì)速率。在工業(yè)應(yīng)用方面，利用超聲波進(jìn)行清洗、
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細(xì)胞培養(yǎng)中的無菌技術(shù)：1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進(jìn)行下一個細(xì)胞株的操作。2.無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、
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一、神經(jīng)干細(xì)胞的分離和傳代無菌條件下取新生SD大鼠(出生48h內(nèi))腦組織，D-Hanks液充分漂洗后，在解剖顯微鏡下剝離腦膜，準(zhǔn)確分離海馬，用眼科剪將海馬剪碎后，再轉(zhuǎn)移到DMEM/F12(1:1)加B27和bFGF(20ng/ml)的無血清培養(yǎng)基，吸管吹打機(jī)械分離制作單細(xì)胞懸液，臺盼藍(lán)染色后細(xì)胞計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為5×104~5個/ml，置于24孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)，每孔加入細(xì)胞懸液500μl。待神經(jīng)球形成后再次機(jī)械分離克隆制作單細(xì)胞懸液，仍以5×104個/ml的細(xì)胞濃度置于24孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)，每孔加
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1、分析速度快，一般分析一個樣品的時間約為1分鐘。2、不需要對樣品進(jìn)行化學(xué)處理，分析步驟簡單。3、無消耗品，無環(huán)境污染，不破壞樣品，經(jīng)濟(jì)。4、一次測試能夠同時得到多種成分或指標(biāo)，甚至開發(fā)多種新指標(biāo)而沒有"通道"限制。5、分析結(jié)果度比濕化學(xué)方法高，因?yàn)閮x器具有優(yōu)異的穩(wěn)定性，高重現(xiàn)性，操作環(huán)節(jié)少，所以數(shù)據(jù)更可靠。6、儀器用途廣泛，能夠放到現(xiàn)場使用，甚至能夠在線實(shí)時檢測。7、可檢測的樣品廣泛，通常是固態(tài)的片煙、煙絲或粉末，也可以是液態(tài)，還可開發(fā)檢測其他輔料的方法。在真假鑒別方面也取得了進(jìn)展。8、可透過
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分子式：C21H20BrN3分子結(jié)構(gòu)英文名：Ethidiumbromide分子量：394.3139g/mol熔點(diǎn)：260-262°C為芳香族熒光化合物EB（Ethidiumbromide，溴化乙錠）溴化乙錠是一種高度靈敏的熒光染色劑，用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA。溴化乙錠用標(biāo)準(zhǔn)302nm紫外光透射儀激發(fā)并放射出橙紅色信號，可用Polaroid底片或帶CCD成像頭的凝膠成像處理系統(tǒng)拍攝。溴化乙錠可以嵌入堿基分子中,導(dǎo)致錯配。溴化乙錠是強(qiáng)誘變劑,具有高致癌性!普通實(shí)驗(yàn)手套（淺黃色乳膠手套
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瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳分離。原理瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳的主要區(qū)別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，物質(zhì)分子通過時會受到阻力，大分子物質(zhì)在涌動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。但由于其孔徑相當(dāng)大，對大多數(shù)蛋白質(zhì)
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與HPLC一樣，分離柱是離子色譜儀重要的組成部分。離子色譜的分離機(jī)理主要是離子交換，基于離子交換樹脂上可離解的離子與流動相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子之間進(jìn)行的可逆交換，不同的離子因與交換劑的親和力不同而被分離，與HPLC不同的是，離子色譜選擇性的改變主要是通過采用不同的固定相來實(shí)現(xiàn)的。1陰離子交換分離柱陰離子交換分離柱使用的填料主要是表面附聚薄殼型陰離子交換樹脂。樹脂的內(nèi)核是苯乙烯一二乙烯苯的共聚物(PS-DVB)，核外是一層磺化層，外層是粒度均勻的單層季銨化乳膠顆粒，以離子鍵結(jié)合在磺化層上。由于
