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【實驗原理】如圖所示,親和層析的高度選擇性使得從某一初始材料中純化,富集某一含量較低的目的蛋白成為可能,因此親和層析是蛋白質(zhì)分離純化過程中有效的方法之一。另外,如果配基與蛋白質(zhì)的親和能力很強,也可同時進行樣品的濃縮。雖然多數(shù)情況下不需要將抗體與其他血清蛋白分開,但如果一旦需要,蛋白A親和層析是一種非常有效的分離方法。蛋白A是從Staphylococcusaureus中獲得,可與抗體重鏈的Fc片段相結(jié)合?,F(xiàn)在已知蛋白A可與多種哺乳動物的IgG相結(jié)合也可與某些IgM和IgA相結(jié)合。如果將蛋白A與固相
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是采用色譜技術(shù)(TLC、GC和HPLC)分離測定光學(xué)異構(gòu)體藥物的有效方法。由于許多藥物的對映體(Enantiomer)之間在藥理、毒理乃至臨床性質(zhì)方面存在著較大差異,有必要對某些手性藥物進行對映體的純度檢查。(一)原理和方法:對映體化合物之間除了對偏振光的偏轉(zhuǎn)方向恰好相反外,其理化性質(zhì)是*相同的,因而難以分離。傳統(tǒng)方法(分步結(jié)晶法、酶消化法等)有很大局限性,特別是難以進行微量分離和測定。60年代前后,TLC、GC法逐漸用于對映體化合物的拆分。但這兩種方法只能拆分不多的化合物,且需要較復(fù)雜的樣品處
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一、培養(yǎng)細胞(culturecell)樣品處理方法:培養(yǎng)動物組織細胞由于沒有細胞壁,因此可以將細胞收集下來,直接加入裂解緩沖液(Lysisbuffer)抽提總蛋白。裂解緩沖液有多種配方,本實驗室主要采用如下成份:1.7MUrea,2MThiourea,4%(w/v)CHAPS,40mMTris-Base,40mMDTT,2%PharmalytepH3-10.其他常用的裂解緩沖液如下:2.9.5Murea,2%(w/v)CHAPS,0.8%(w/v)PhamarlytepH3-10,1%(w/v)
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儀器用途阿貝折射儀是能測定透明、半透明液體或固體的折射率nD和平均色散nF-nC的儀器(其中以測透明液體為主),如儀器上接恒溫器,則可測定溫度為0℃~70℃內(nèi)的折射率nD。折射率和平均色散是物質(zhì)的重要光學(xué)常數(shù)之一,能借以了解物質(zhì)的光學(xué)性能、純度、及色散大小等。本儀器能測出蔗糖溶液的質(zhì)量分數(shù)(錘度Brix)(0~95%,相當于折射率為1.333~1.531)。故此儀器使用范圍甚廣,是石油工業(yè)、油脂工業(yè)、制藥工業(yè)、制漆工業(yè)、日用化學(xué)工業(yè)、制糖工業(yè)和地質(zhì)勘察等有關(guān)工廠、學(xué)校及有關(guān)科研單位*的常用設(shè)備之
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流式細胞儀(flowcytometer)是一種能夠探測和計數(shù)以單細胞液體流形式穿過激光束的細胞檢測裝置,由于在檢測中使用的細胞標志示蹤物質(zhì)為熒光標記物,因此,用來分離、鑒定細胞的流式細胞儀有被稱為熒光激活細胞分類儀,是分離和鑒定細胞群及亞群的一種強而有力的應(yīng)用工具。流式細胞儀實驗方法原理流式細胞儀的使用一般分為三個步驟。,是儀器前階段,包括試劑的準備,細胞制備、細胞的熒光染色;第二,是流式細胞儀階段,主要是儀器的操作;第三,是結(jié)果分析階段。實驗材料淋巴細胞外周血的白細胞試劑、試劑盒FACS緩沖液
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色譜儀分離方法的選擇原則:一、根據(jù)相對分子質(zhì)量選擇:1、相對分子質(zhì)量很低的樣品采用氣相色譜。2、液液分配色譜、液固吸附色譜和離子交換色譜適合分析相對分子質(zhì)量為200~2000的樣品。3、相對分子質(zhì)量大于2000的樣品,采用凝膠色譜為優(yōu)。二、根據(jù)溶解度選擇:1、溶于水并能離解的樣品,采用離子交換色譜。2、溶于烴類(如苯或異辛烷等)的樣品,可采用液固吸附色譜。3、溶于CCl4的樣品,多采用液液分配色譜和液固吸附色譜。4、既溶于水又溶于異丙醇的樣品,常用水和異丙醇的混合液作液液分配色譜的流動相,以疏水
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液相色譜儀是利用混合物各組分在固定相和流動相中溶解、分配或吸附等化學(xué)作用性能的差異,使各組分在作相對運動的兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達到相互分離。液相色譜儀在食品分析、環(huán)境分析、生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗和無機分析等領(lǐng)域得到廣泛使用。一般來說,80%~85%的有機物原則上可采用液相色譜儀分析。一、在食品分析中的應(yīng)用:1、食品營養(yǎng)成分分析:蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、色素、維生素、香料、有機酸(鄰苯二甲酸、檸檬酸和蘋果酸等)、有機胺和礦物質(zhì)等分析。2、食品添加劑分析:甜味劑、防腐劑、著色劑(檸檬黃、莧菜紅
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(一)白酒中有關(guān)醛、醇、酯的分析:采用氫焰離子化檢測器,使用20%DNP+7%吐溫-80,或蘭州化物所大口徑¢0.53mm毛細管柱,完成濃香型白酒和清香型白酒中主要的醇、醛、酸、酯各個組分的分析。使用毛細管柱除提高了分析效率外,還能檢出有機酸,為復(fù)雜的釀造發(fā)酵工藝提供了更多有價值的信息。分析結(jié)果*符合國標GB10345.7-89/GB10345.8-89。(二)植物油中殘留溶劑的檢測:可以按照國標GB/T5009.37-2003頂空氣相色譜法對浸出油中6號溶劑殘留量進行測定。采用氫焰離子化檢測器