近日,中科院青島生物能源與過程研究所單細胞中心研發(fā)出一種新型單細胞分選技術(shù)——光鑷輔助靜態(tài)池成像分選技術(shù)(OPSI)。該技術(shù)可用于明場、熒光、拉曼成像下的目標單細胞分選,具有高通量、能保持細胞原位活性、“所見即所得”等特點。對高質(zhì)量的單細胞基因組/轉(zhuǎn)錄組測序有著很大的支撐作用。相關(guān)研究成果發(fā)表于微流控領(lǐng)域國際期刊《芯片實驗室》。
隨著生命科學(xué)研究深入到單細胞水平,單細胞分選技術(shù)已經(jīng)成為研究復(fù)雜細胞群體中單個細胞的個體性和異質(zhì)性不可缺少的工具。精確、便捷、低損傷、使用范圍廣的目標表型單細胞獲取手段對于單細胞水平的基因組、蛋白質(zhì)組、代謝組等組學(xué)研究意義重大。目前常用的研究細胞表型信息的技術(shù)包括明場圖像、熒光圖像、拉曼光譜等,而能匯集上述信息并具備單細胞精度索引、所見即所得特點的單細胞分選技術(shù)在單細胞分析中應(yīng)用廣泛。
單細胞中心研發(fā)光鑷輔助靜態(tài)池成像分選技術(shù)以此前開發(fā)的拉曼分選-測序技術(shù)RAGE-Seq為基礎(chǔ)。
RAGE-Seq通過聯(lián)用光鑷及微流控液滴技術(shù),將特定拉曼表型的細菌單細胞從群體中精準分離,并包裹到皮升級液滴中,然后采用宏觀移液的方式便可將包裹有目標細胞的液滴導(dǎo)出轉(zhuǎn)移到試管中,從而快速、精確、簡便地實現(xiàn)“單個細胞-單個液滴-單個試管”的拉曼分選流程。
OPSI在此基礎(chǔ)上提出了一種靜態(tài)池成像分選的思路,即在微流控芯片中構(gòu)建流速為0的穩(wěn)定靜態(tài)流場,對樣本細胞進行限域,并在該流場內(nèi)進行平面明場、熒光成像或拉曼掃描,選取目標細胞。之后通過低細胞損傷的1064 nm光鑷將目標單細胞移出靜態(tài)流場,并進行單細胞液滴包裹導(dǎo)出完成分選。
OPSI以精確索引的方式進行分類,具有“所見即所得”的特點,并解決了RAGE-Seq操作過程稍顯繁瑣、分選通量較低等問題,廣泛適用于從細菌、古菌到人體細胞等不同尺寸大小的單細胞。
據(jù)了解,單細胞中心已和當?shù)仄髽I(yè)合作,推出了自動化、智能化的單細胞微液滴分選系統(tǒng)系列產(chǎn)品,并與國際顯微鏡和顯微光譜儀龍頭產(chǎn)商合作,在全球科學(xué)儀器市場進行推廣。OPSI及相關(guān)細胞分選產(chǎn)品的成功開發(fā)與推廣不僅為單細胞多組學(xué)研究提供了有力的工具,也是我國生命科學(xué)儀器發(fā)展的重要成果。其在全球市場的推廣將擴大我國生命科學(xué)儀器的國際影響力,推動國產(chǎn)儀器向海外市場開拓的進程。
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