紫外可見(jiàn)近紅外分光光度計(jì)定量測(cè)定 定量測(cè)定
3.1 定量測(cè)定簡(jiǎn)介
定量測(cè)定是用待測(cè)樣品的測(cè)量值與標(biāo)準(zhǔn)樣品的測(cè)量值進(jìn)行比對(duì)，后計(jì)算出待測(cè)樣品的
濃度值的一種測(cè)定方法。定量測(cè)定可分為單波長(zhǎng)定量、雙波長(zhǎng)定量、三波長(zhǎng)定量、一次微分
定量、二次微分定量、三次微分定量等諸多的測(cè)量方法。本系統(tǒng)暫支持單波長(zhǎng)，雙波長(zhǎng)兩種
測(cè)量方法。
3.2 定量測(cè)定參數(shù)設(shè)置
激活定量測(cè)定窗口，選擇【測(cè)量】菜單下的【參數(shù)設(shè)置】子菜單，即可打開(kāi)定量測(cè)定設(shè)
置窗口。
窗口共有五個(gè)選項(xiàng)卡，分別是：【測(cè)量】、【校正曲線(xiàn)】、【儀器】。其中，儀器內(nèi)容與儀器
性能和附件設(shè)置窗口的內(nèi)容**。
測(cè)量選項(xiàng)卡
測(cè)量選項(xiàng)卡主要提供定量測(cè)定的方法設(shè)置、波長(zhǎng)設(shè)置和重復(fù)測(cè)量設(shè)置等。您可以選擇不
同的測(cè)量方法來(lái)完成不同的定量要求。同時(shí)還可以設(shè)置樣品編號(hào)和測(cè)量重復(fù)次數(shù)。
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? 測(cè)量方法
設(shè)置定量測(cè)定的測(cè)量方法?？蛇x的測(cè)量方法有：【單波長(zhǎng)法】、【雙波長(zhǎng)法】。您可以根據(jù)
不同的測(cè)試要求對(duì)方法進(jìn)行選擇。如果您選擇了單波長(zhǎng)法，則需要在【主波長(zhǎng)】編輯框中輸
入測(cè)定波長(zhǎng)。如果您選擇了雙波長(zhǎng)，則需要在【基線(xiàn)波長(zhǎng) 1】編輯框中輸入基線(xiàn)波長(zhǎng)。有關(guān)
定量測(cè)定方法的詳細(xì)介紹，請(qǐng)參閱 附錄 A 定量測(cè)定的應(yīng)用方法。
? 樣品編號(hào)
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品的標(biāo)識(shí)名稱(chēng)及編號(hào)。
? 其他設(shè)置
在其他設(shè)置中，您可以設(shè)置對(duì)樣品進(jìn)行重復(fù)測(cè)量。重復(fù)測(cè)量是對(duì)一個(gè)樣品進(jìn)行多次測(cè)量，
然后取多次測(cè)量結(jié)果的平均值進(jìn)行含量計(jì)算。因此，如果您選擇了【重復(fù)測(cè)量】選項(xiàng)，還需
要在【重復(fù)次數(shù)】編輯框中輸入需要重復(fù)測(cè)量的次數(shù)，這樣才能夠達(dá)到重復(fù)測(cè)量的目的。重
復(fù)測(cè)量可使測(cè)量的數(shù)據(jù)更為準(zhǔn)確，但測(cè)量所花費(fèi)的時(shí)間要比正常測(cè)量梢長(zhǎng)一些。
校正曲線(xiàn)選項(xiàng)卡
校正曲線(xiàn)選項(xiàng)卡允許您對(duì)校正曲線(xiàn)的參數(shù)進(jìn)行設(shè)置?？稍O(shè)置的參數(shù)包括：【曲線(xiàn)方程】、
【方程次數(shù)】、【濃度單位】、【校正方法】等。
? 曲線(xiàn)方程
設(shè)置校正曲線(xiàn)所使用的方程：C=f(Abs),是以吸光度做為變化量來(lái)求解濃度值。
方程次數(shù)
方程次數(shù)表示校正曲線(xiàn)所使用的方程的次數(shù)，也可以稱(chēng)為階數(shù)。就是我們常說(shuō)的“一元
二次方程”、“一元三次方程”中的“二次”和“三次”，主要是指方程中變化量的次數(shù)。

可選的方程次數(shù)有：【一次】、【二次】、【三次】和【四次】。其中，一次方程也可以稱(chēng)“線(xiàn)性
方程”，其他的則稱(chēng)為“非線(xiàn)性方程”。由于紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的測(cè)光準(zhǔn)確度和重復(fù)性都比
較好，在允許的吸光度范圍內(nèi)其測(cè)量的數(shù)據(jù)與濃度值基本程線(xiàn)性變化，因此，線(xiàn)性方程應(yīng)用
得比較廣泛。您可以根據(jù)實(shí)際情況來(lái)對(duì)曲線(xiàn)方程進(jìn)行選擇。
? 濃度單位
設(shè)置樣品系列的濃度單位。默認(rèn)的濃度單位有：【ηg/μl】、【ηg/ml】、【μg/μl】、【μg/ml】、
【mg/l】、【ppb】、【ppm】和【mol/l】。如果沒(méi)有您所需要的濃度單位，您還可以手工輸入一
個(gè)濃度單位。
? 校正方法
校正方法共分為兩種，分別是：【濃度法】和【系數(shù)法】。濃度法要求您輸入標(biāo)準(zhǔn)溶液的
濃度，然后對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行吸光度測(cè)量，得到測(cè)量數(shù)值后，與輸入的濃度進(jìn)行曲線(xiàn)擬和并計(jì)
算出方程的系數(shù)與相關(guān)性。而系數(shù)法則要求您直接輸入方程的各項(xiàng)系數(shù)，不用進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)樣品
的測(cè)量。例如，如果您將方程次數(shù)設(shè)置為二次，同時(shí)選擇了系數(shù)法，則需要輸入三個(gè)方程系
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數(shù)，即：K0、K1、K2。K0 表示常數(shù)項(xiàng)，K1 表示一次項(xiàng)系數(shù)，K2 表示二次項(xiàng)系數(shù)。
3.3 定量測(cè)定
定量測(cè)定窗口共分為四個(gè)部分，即：【標(biāo)準(zhǔn)樣品表格】、【未知樣品表格】、【校正曲線(xiàn)】
和【參數(shù)列表】。
校正曲線(xiàn)
標(biāo)準(zhǔn)樣品表格
參數(shù)列表
樣品表格

測(cè)量表格
標(biāo)準(zhǔn)樣品表格負(fù)責(zé)顯示標(biāo)準(zhǔn)樣品的測(cè)量結(jié)果。一般情況下，表格共有八列，分別是：【序
號(hào)】、【編號(hào)】、【類(lèi)型】、【濃度】、【吸光度】、【測(cè)定波長(zhǎng)的吸光度】、【標(biāo)準(zhǔn)偏差】和【相對(duì)標(biāo)
準(zhǔn)偏差】。如果您使用雙波長(zhǎng)法或三波長(zhǎng)法，表格中還將顯示其他測(cè)量波長(zhǎng)的數(shù)值。
【序號(hào)】：表示樣品數(shù)量。
【編號(hào)】：為樣品進(jìn)行名稱(chēng)編號(hào)，可編輯。
【類(lèi)型】：對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)樣品，類(lèi)型為“標(biāo)準(zhǔn)樣品“，對(duì)于未知樣品，類(lèi)型為“未知樣
品”。
【濃度】：樣品的濃度值。
【吸光度】：樣品的終吸光度值。
表 0-1 定量測(cè)定計(jì)算方法
單波長(zhǎng)法：
Abs =        A
1
雙波長(zhǎng)法：        Abs = A -
1 A
2
雙波長(zhǎng)系數(shù)法： Abs = A - A • K
1 2
表中，【Abs】表示終的吸光值，【A1】主波長(zhǎng)的吸光值?！続2】基線(xiàn)波長(zhǎng) 1 的吸
光值?！続3】基線(xiàn)波長(zhǎng) 2 的吸光值?！綤】表示雙波長(zhǎng)系數(shù)法中的系數(shù)。
【測(cè)定波長(zhǎng)的吸光度】：樣品在相應(yīng)波長(zhǎng)點(diǎn)的吸光度值。
 【標(biāo)準(zhǔn)偏差】：重復(fù)測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)偏差值。
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【相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差】：重復(fù)測(cè)量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差值。如果未設(shè)置重復(fù)測(cè)量，標(biāo)準(zhǔn)偏差
和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均為零。
進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)量和未知樣品測(cè)量時(shí)，可點(diǎn)擊相應(yīng)的測(cè)量表格，表格上方將顯示“（使
用中）”的字樣，表示此表格已經(jīng)激活，所有的測(cè)量均在此表格中操作。
校正曲線(xiàn)
校正曲線(xiàn)負(fù)責(zé)顯示當(dāng)前的校正曲線(xiàn)圖形。如果您未進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)量，則無(wú)圖形顯示。
參數(shù)列表
參數(shù)列表顯示當(dāng)前的定量測(cè)量參數(shù)。包括曲線(xiàn)方程、系數(shù)等信息。
測(cè)量
如果您在定量測(cè)定參數(shù)設(shè)置中，將校正方法設(shè)置為濃度法，則在測(cè)量之前，需要在定量
測(cè)定表格中輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度值，然后才可以測(cè)量。直接點(diǎn)擊測(cè)量按鈕，此時(shí)系統(tǒng)會(huì)提示
您輸入一個(gè)濃度值。
輸入濃度值后，點(diǎn)擊【確定】按鈕，系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)添加一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品，將濃度值設(shè)置為您
剛才設(shè)置的數(shù)值，并立即測(cè)量此樣品。
如果您在定量測(cè)定參數(shù)設(shè)置中，將校正方法設(shè)置為系數(shù)法，則不需要對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行測(cè)
量。直接測(cè)量未知樣品即可。
3.4 保存測(cè)量文件
定量測(cè)定的數(shù)據(jù)同樣可以保存的磁盤(pán)。選擇【文件】菜單下的【保存】子菜單,即可打
開(kāi)文件保存窗口，在窗口中輸入要保存的文件名，點(diǎn)擊【保存】按鈕即可。

紫外可見(jiàn)近紅外分光光度計(jì)定量測(cè)定