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養(yǎng)殖場污水處理設(shè)備
在畜禽養(yǎng)殖廢水方面,四環(huán)素類、磺胺類、大環(huán)內(nèi)脂類抗生素的抗性基因研究較多,按抗性機制分類,畜禽養(yǎng)殖廢水中抗性基因分布特征詳見表 1.)測試了豬場廢水中不同機制的四環(huán)素抗性基因,發(fā)現(xiàn)核糖體保護(靶向保護)抗性基因(tetQ、tetM、tetW、tetO)比外排泵機制抗性基因(tetA、tetB、tetC、tetL)、酶修飾(抗生素失活機制)抗性基因(tetX)豐度高,其在豬場廢水中豐度分別為9.25×10-2、5.53×10-2、1.69×10-2和1.32×10-2 copies/16S rRNA.而和)研究也表明tetQ、tetM、tetW、tetO在豬場廢水中具有較高的豐度.)研究了豬糞水厭氧發(fā)酵土壤生態(tài)系統(tǒng)中3種核糖體保護機制的四環(huán)素類抗性基因豐度tetQ>tetO>tetW,其中tetQ平均豐度高1.84×10-1 copies/16S rRNA.)調(diào)查了上海地區(qū)豬場和牛場廢水中磺胺類和四環(huán)素類抗性基因,含量高的分別為sulA(108~1010 copies · mL-1)和tetW(106~107 copies · mL-1),而sulIII含量與磺胺類抗生素濃度的相關(guān)性較好,這可能與磺胺類抗生素易生物降解性有關(guān);tetM含量與四環(huán)素類抗生素濃度相關(guān)性較弱.)也指出TC與tet無顯著相關(guān)性.除四環(huán)素類與磺胺類抗生素之外,泰樂菌素是應(yīng)用廣泛的獸用抗生素之一,可能引起大環(huán)內(nèi)脂類抗性基因以及MLSB的多重抗性基因豐度的提高.)對3家豬場大環(huán)內(nèi)脂抗性基因erm進行了定量檢測,廢水中ermB、ermF含量較高(在108~1010 copies · mL-1之間),而ermX在104~106 copies · mL-1范圍.通過寡聚糖雜交探針測試方法,發(fā)現(xiàn)豬糞水和氧化塘廢水中50%的rRNA攜帶MLSB多重抗性基因.
除厭氧消化工藝以外,氧化塘、人工濕地也是畜禽養(yǎng)殖場廣泛使用的廢水處理工藝.Joy等.調(diào)查了氧化塘儲存豬場廢水40 d抗性基因的變化,ermB和ermF的豐度分別降低了50%~60%和80%~90%,而tetX和tetQ豐度的消減符合一級反應(yīng)動力學(xué)模型.將氧化塘處理豬場廢水后抗性基因的去除趨勢歸為兩類,一類是相對豐度大幅降低甚至低于檢測限,包括tetB、tetL;另一類為經(jīng)處理后豐度不變甚至有所提高,包括tetG、tetM、tetO和tetX,可能因為這類基因常位于轉(zhuǎn)移原件上,在廢水中發(fā)生了基因的水平轉(zhuǎn)移.鄭加玉等采用水平流人工濕地處理豬場廢水,結(jié)果表明tetW、tetM和tetO的濃度平均去除率分別為95.73%、92.21%和95.05%;可能由于土壤對抗性基因的吸附作用,濕地土壤中抗性基因的豐度有明顯升高現(xiàn)象.Liu等模擬垂直流人工濕地中添加沸石研究抗性基因的消減規(guī)律,發(fā)現(xiàn)在HRT為30 h時豬場廢水抗性基因去除效果較好.
4.2 膜生物反應(yīng)器(Membrane bioreactor,MBR)工藝
膜分離技術(shù)近年已在畜禽養(yǎng)殖廢水處理領(lǐng)域得到了一定的研究與應(yīng)用,并日益得到重視.例如,Padmasiri等采用厭氧MBR處理豬場廢水,有機負荷為1.0 kg · m-3 · d-1高于其他厭氧消化工藝采用好氧MBR處理豬場厭氧消化液TN負荷0.11 kg · m-3 · d-1較高.然而針對MBR處理畜禽養(yǎng)殖廢水抗性基因去除規(guī)律的研究較少.Du等調(diào)研了污水處理廠采用A2OMBR工藝處理生活和工業(yè)混合廢水對四環(huán)素類和磺胺類抗性基因的去除效果,結(jié)果表明MBR工藝對tetG、tetW、tetX、sul1和intI1分別去除了2.20、2.90、1.71、2.15和2.07 log copies · mL-1,膜出水抗性基因豐度仍然較高(2.85~4.97 log copies · mL-1),然而作者并未給出膜孔徑等膜分離工藝參數(shù).
同生物處理工藝相比,MBR的生物量高,可能存在較大的抗性基因水平轉(zhuǎn)移風險.Yang等以RP4質(zhì)粒作為水平轉(zhuǎn)研究對象,研究了MBR中抗性基因的水平轉(zhuǎn)移效率,結(jié)果表明RP4在MBR中維持較高豐度104 copies/mg · biosolid,具有較高的水平轉(zhuǎn)移效率(2.76×10-5/recipient),而RP4在活性污泥法的水平轉(zhuǎn)移效率約4×10-6 /recipient;盡管存在較高的水平轉(zhuǎn)移效率,但由于微濾膜(PVDF,0.22 μm)的截留作用,出水檢測不到攜帶抗性基因的RP4.由于膜的截留,一方面可消減膜出水的抗性基因濃度,另一方面導(dǎo)致反應(yīng)器內(nèi)污泥濃度高,可能使抗性基因在反應(yīng)器內(nèi)積累,提高了污泥中抗性基因的水平傳播.污泥是重要的抗性基因蓄積庫,經(jīng)過堆肥或厭氧消化處理后作為肥料土地利用,污泥的土地利用存在抗性基因的污染隱患.
4.3 消毒工藝
已有研究考察了消毒工藝(包括紫外、臭氧、加氯)處理畜禽養(yǎng)殖廢水時對耐藥菌的殺滅效果.研究發(fā)現(xiàn),加氯量和臭氧用量分別為30 mg · L-1和100 mg · L-1時,豬場氧化塘廢水中細菌總數(shù)分別去除了2.2~3.4 log cfu · mL-1和3.3~3.9 log cfu · mL-1,然而林可酰胺、*、磺胺甲惡唑耐藥菌對加氯消毒不敏感,而四環(huán)素耐藥菌對加氯消毒敏感,臭氧對耐藥菌的影響并未給出相應(yīng)結(jié)果.加氯對抗*腸球菌具有較好的滅殺作用.而GomezAlvarez等研究加氯消毒對飲用水中抗性基因的影響,宏基因組數(shù)據(jù)表明加氯消毒后飲用水中仍含有編碼β內(nèi)酰胺酶(bla)、外排泵等抗生素抗性基因,表明耐受氧化性的細菌同時攜帶抗生素抗性基因.關(guān)于紫外和臭氧對畜禽養(yǎng)殖廢水抗性基因的去除研究較為缺乏,研究了紫外滅菌對市政排水抗性基因消減的影響,結(jié)果表明紫外強度為249.5 mJ · cm-2時對抗性基因消減效果佳,tetX和16S rRNA分別去除了0.58和0.60 log.Oh等采用模擬實驗研究了臭氧對耐藥性埃希氏大腸桿菌(Eschericia coli, E. coli)的去除,結(jié)果表明臭氧劑量為3 mg · L-1時耐藥性E. coli去除了1 log.
4.4 組合工藝
畜禽養(yǎng)殖廢水通常采用厭氧好氧組合工藝進行處理.Chen等在監(jiān)測某豬場夏季廢水處理工藝對抗性基因去除效果時,發(fā)現(xiàn)經(jīng)過厭氧消化好氧濾池處理,ermB豐度分別降低了1.2 log、0.9 log copies · mL-1,而ermB在出水儲存池中已低于檢測限;tetG在厭氧、好氧過程分別降低了1.1 log、3.4 log copies · mL-1.對我國東部某豬場廢水采用厭氧消化與氧化塘組合工藝去除抗性基因的效果進行了調(diào)查,發(fā)現(xiàn)tetO、tetQ、tetW有明顯去除,豐度從10-1降至10-3 copies/16S rRNA,這可能由于tetQ和tetW宿主細菌多為厭氧菌,而tetO多為好氧菌攜帶,這些抗性基因無法在厭氧好氧交替環(huán)境中維持.而關(guān)于生物處理與消毒組合工藝對畜禽廢水中抗性基因的去除作用,研究結(jié)果非常缺乏.
5 畜禽養(yǎng)殖廢水農(nóng)田利用對土壤和植物中抗性基因的影響
由于畜禽養(yǎng)殖廢水中富含有機質(zhì)、氮、磷等營養(yǎng)物質(zhì),通常經(jīng)過厭氧發(fā)酵、氧化塘等工藝處理后,作為肥水還田利用,這既節(jié)約了處理成本,也促進了養(yǎng)分循環(huán)利用,目前我國、美國、歐洲等都推行畜禽養(yǎng)殖廢水的農(nóng)田利用.然而,畜禽養(yǎng)殖廢水農(nóng)田利用可能產(chǎn)生抗性基因從養(yǎng)殖場向農(nóng)田土壤的傳播風險.
土壤是重要的抗性基因儲存庫,其中主要的抗性基因來源包括土壤中固有的抗性微生物所攜帶的抗性基因,以及外源進入土壤中抗性微生物所攜帶的抗性基因,但有關(guān)土壤中抗性基因的研究較為缺乏.)指出豬糞施用于農(nóng)田存在抗性基因的水平轉(zhuǎn)移風險,由于糞源微生物與土壤微生物不同,糞源微生物進入土壤后在幾個月中大量消失,但抗性基因可通過水平轉(zhuǎn)移進入土壤本土微生物中,進而引起土壤微生物抗性基因豐度的增加.而研究發(fā)現(xiàn)牛糞農(nóng)田利用引起土壤中抗性基因blaCEP豐度的提高是由于攜帶抗性基因的假單胞菌(Pseudomonas sp.)和紫色桿菌(Janthinobacterium sp.)的增殖,而這兩種細菌來自于土壤,而非糞便引入.糞便農(nóng)田利用可引起抗性基因豐度提高,但其微生物學(xué)機制仍不明確.
養(yǎng)殖場污水處理設(shè)備
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