液相色譜柱C18使用問題集錦

問：正常使用一個C18液相色譜柱能用多長時間？

答：柱壽命一般不按時間計算，按持續(xù)進(jìn)樣針數(shù)比較科學(xué)。一般正常使用維護(hù)，不超過pH和溫度等范圍，C18柱能達(dá)到500-2000針進(jìn)樣的壽命，視樣品干凈程度的不同而不同。

問：一根常用的c18色譜柱，拿到一根新柱的時候應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù)？為什么要這樣做？

答：新柱活化，實際上是一個平衡的過程，除了用流動相平衡外，有時候還必須用所測樣品對新柱進(jìn)行平衡，特別是測定分子量比較高的多肽，尤其重要。因為分子量高的物質(zhì)分子，擴(kuò)散速度慢，平衡所需時間也相應(yīng)較長。具體平衡方式也很簡單，多進(jìn)幾次樣品，直到峰面積和保留時間穩(wěn)定，再進(jìn)行正式進(jìn)樣測定。

如果要加快平衡時間，把前面用來平衡的進(jìn)樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成，連續(xù)進(jìn)樣多針。用待測物對新柱平衡，目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。

問：做農(nóng)藥殘留分析的，不同的基質(zhì)雜質(zhì)含量是不同的，我用C18分析時有可能一次就污染了，我用高流速，和反向沖洗都解決不了，是不是這根柱子就廢了，有沒有其他的辦法？

答：高流速反向沖洗是對的，關(guān)鍵你用了什么溶劑沖洗呢？用原來的流動相沖洗肯定不管用，要不然就不會累積在柱子上了。你應(yīng)該用流動相中的強(qiáng)溶劑B沖洗，如果不行，就需要啟用再生的程序，當(dāng)然再生時用的溶劑更強(qiáng)。