設置熒光分光光度計的狹縫要注意哪些事項

2022

06-24

11:00:01

 210

來源：化工儀器網(wǎng)

　　熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù)，從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。通過對這些參數(shù)的測定，不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化，從而闡明分子結構與功能之間的關系。熒光分光光度計的激發(fā)波長掃描范圍一般是190~650nm，發(fā)射波長掃描范圍是200~800nm?？捎糜谝后w、固體樣品（如凝膠條）的光譜掃描。

　　熒光強度跟很多因素有關，如分子結構、存在狀態(tài)、溶液濃度或薄膜厚度、溫度、選擇的激發(fā)波長、測試狹縫寬度等因素。熒光強度在不同儀器上的測量值存在較大差異，不具有可比性，但是其峰位還是較容易確定的，可以用來判斷何種物質(zhì)。進行熒光定量分析，必須固定一些條件。

　　狹縫的大小對熒光強度很重要，狹縫大小可根據(jù)你所測物質(zhì)的熒光強度大小作出適當?shù)恼{(diào)整。在同一濃度，如熒光強度過大，超過儀器量程，可減小狹縫。但是，需要指出的是，不能僅憑狹縫的大小來改變熒光強度，還要考慮分辨率的問題。對于熒光掃描而言，狹縫加大可以使熒光強度提高同時重現(xiàn)性得到提高，但是分辨率隨之降低。狹縫決定分辨率，儀器其它結構已經(jīng)固定(光柵的刻線數(shù)、焦距以及綜合的線色散系數(shù))，狹縫大小就決定分辨率的高低。對于實際使用，狹縫大小需要和測定的峰的半峰寬相匹配，過大，峰就變形了。狹縫大小也決定了光通量大小。按照經(jīng)驗數(shù)值，狹縫開大1倍，光通量將增大4倍?！　?/div>

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