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開播時間04-22 13:48液相色譜梯度洗脫的原理和配置特點
梯度洗脫的原理如下:
具體地講,當(dāng)樣品隨梯度起點的流動相進入色譜柱入口時,由于起點流動相中弱洗脫溶劑A含量較,洗脫溶劑B含量較低,化合物C1(保留性適中)和化合物C2(保留較)因分配系數(shù)(k值)較而滯留于色譜柱入口附近,幾乎未移動。一段時間后,B增加到一定數(shù)值,C1的k值達(dá)到足夠小(比如小于10),其在柱中的移動速率明顯增大,并且隨著B的增加,其移動速率愈加快速,直到tC1時流出色譜柱,被檢測器檢測到并被記錄成色譜峰C1,tC1雖然比等度時的保留時間長多,但C1的的平均k值卻小,因而色譜峰并未展寬,靈敏度仍處于較水平。B持續(xù)增加,在隨后的某個時間點,C2的k值也降到10以下,C2的移動速率也開始變快,以與C1類似的方式于tC2被洗脫出色譜柱,其平均k值同樣小,色譜峰亦未展寬,靈敏度處于較水平。
流動相的梯度變化即流動相性、PH值等的梯度變化,即洗脫能力成梯度變化。
梯度洗脫配置相對復(fù)雜,配置特點:
1. 二元壓梯度洗脫需要配置兩臺壓泵,一個混合器及連接管理,配置較,成本;
2. 二元低壓梯度洗脫需要配置一臺壓泵、一個二元比例閥、一臺在線脫氣機、一個混合器(脫氣機和混合器視情況而定,可不選)及連接管路,配置較低,成本較低;
3. 四元低壓梯度洗脫需要配置一臺壓泵、一個四元比例閥、一臺在線脫氣機、一個混合器(視情況而定,可不選)及連接管路,配置較,成本較低。
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