色譜儀的衍生化主要是為了提目的物的可檢測性。對于氣相色譜,主要是為了增目的物的揮發(fā)性或改善目的物的性。對于液相色譜儀,主要是為了提檢測器對目的物的響應(yīng)。適用的化合物:生物酸、生物堿、胺類、抗生素和氨基酸類等。
衍生化分類:
1、柱前衍生:在分析物經(jīng)過色譜柱前與衍生劑反應(yīng),反應(yīng)產(chǎn)物在色譜柱上實(shí)現(xiàn)分離,實(shí)際分離的是衍生產(chǎn)物,檢測的也是衍生產(chǎn)物。
點(diǎn):
(1)相對自由地選擇反應(yīng)條件。
(2)不存在反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的限制。
(3)衍生副產(chǎn)物可進(jìn)行預(yù)處理。
(4)容易允許多步反應(yīng)的進(jìn)行。
(5)有較多的衍生劑可選擇。
(6)不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備。
缺點(diǎn):
(1)形成的衍生副產(chǎn)物可能對色譜分離造成較大困難。
(2)在衍生化過程中,容易引入雜質(zhì),或損失樣品。
2、柱后衍生:分析物在色譜柱中實(shí)現(xiàn)分離后,在衍生池內(nèi)與衍生劑反應(yīng),檢測的是衍生產(chǎn)物。
點(diǎn):
(1)重現(xiàn)性好,影響因素少,引入物質(zhì)比較少。
(2)分析物可以在其原有的形式下進(jìn)行分離,容易選用已有的分析方法。
缺點(diǎn):
(1)對于一定的溶劑和有限的反應(yīng)時(shí)間來說,目前只有有限的反應(yīng)可供選擇。
(2)可能有擴(kuò)散問題。
(3)需要額外的儀器設(shè)備。
衍生化要求:
1、衍生劑必須過量且穩(wěn)定。衍生劑不過量,反應(yīng)不*,檢測不充分。衍生劑不穩(wěn)定,重現(xiàn)性差。
2、衍生劑、衍生產(chǎn)物和衍生副產(chǎn)物容易分離。只能檢測到衍生產(chǎn)物好。
3、衍生反應(yīng)快速、*。
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