2015版中國藥典款冬花液相色譜分析

■《中國藥典》 收載情況

【來源】　本品為菊科植物款冬Tussilago farfaraL.的干燥花蕾。
【功能與主治】　潤肺下氣，止咳化痰。用于新久咳嗽，喘咳痰多，勞嗽咳血。
【含量測定】　款冬酮照液相色譜法（通則0512)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(85:15)為流動相；檢測波長為220nm。理論板數(shù)按款冬酮峰計算應(yīng)不低于5000。
對照品溶液的制備：取款冬酮對照品適量，精密稱定，加流動相制成每1mL含50μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備：取本品粉末(過4號篩)約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20mL，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率40kHZ)1小時，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，取續(xù)濾液，即得。
測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

■款冬花藥材液相色譜方法的建立

【色譜行為描述】
　　《中國藥典》中款冬花的含量測定以款冬酮為質(zhì)量評價依據(jù)，其在Inertsil ODS-3(4.6×250mm，5μm )中的色譜行為是：在流動相組成為甲醇-水系統(tǒng)時，峰與雜質(zhì)峰距離較近，流動相的比例對款冬酮及相鄰峰的分離有顯著的影響，流動相的比例為甲醇-水（75:25）時其分離效果，款冬花色譜圖中雜質(zhì)峰與款冬酮峰的分離效果較好，且款冬酮峰的保留時間比較合適；柱溫對款冬酮的保留時間及與相鄰色譜峰的分離度有微小影響。*流動相配比范圍：甲醇：水=（75-76）:（25-24），柱溫范圍：25-40℃。經(jīng)過考察，在流動相甲醇-水比例為75:25，柱溫40℃的色譜條件下能得到較滿意的分析效果。
　　在上述色譜條件下，采用Shim-pack VP-ODS(4.6×250mm，5μm )色譜柱，柱效和采用Inertsil ODS-3(4.6×250mm，5μm )色譜柱相當(dāng)，保留時間比采用Inertsil ODS-3(4.6×250mm，5μm )色譜柱短大約7min，亦可得到良好的分析效果。
樣品來源：　本品為菊科植物款冬Tussilago farfaraL.的干燥花蕾。
對照品：　款冬酮*成都生物研究所，批號：MUST-15092401，含量：98.92%）
對照品溶液的制備：　取款冬酮對照品適量，精密稱定，加流動相制成每1mL含50μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備：　取本品粉末(過4號篩)約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20mL，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率40kHZ)1小時，放冷，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，取續(xù)濾液，即得。

■款冬酮對照品溶液：

■供試品溶液：

■款冬酮標(biāo)準(zhǔn)曲線：

■款冬酮的重復(fù)性：

附注1：Shim-pack VP-ODS (4.6×250mm，5μm )色譜柱用于款冬花分析 

■款冬酮對照品溶液：

■供試品溶液：

* 實驗數(shù)據(jù)由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部陳世忠教授課題組提供