近日,基因中心作物品質(zhì)控制與多組學(xué)技術(shù)創(chuàng)新團隊(籌)在多種真菌毒素的同時高靈敏檢測技術(shù)研發(fā)方面取得新進展。研究成果以“Protein Nanoscaffold Enables Programmable Nanobody-Luciferase Immunoassembly for Sensitive and Simultaneous Detection of Aflatoxin B1 and Ochratoxin A”為題在國際權(quán)威期刊Journal of Hazardous Materials(中科院1區(qū)TOP,IF=13.6)在線發(fā)表?;蛑行膮墙B文副研究員和聯(lián)合培養(yǎng)研究生胥錦濤為論文的共同第一作者,基因中心晏石娟研究員為論文的通訊作者。
農(nóng)產(chǎn)品在生產(chǎn)、加工、運輸和存儲等過程中容易被曲霉真菌侵染,從而積累多種真菌毒素,其中最常見的真菌毒素包括黃曲霉毒素、赭曲霉毒素等。食用被真菌毒素污染的食品會導(dǎo)致癌癥、不孕癥和免疫缺陷等重大疾病,嚴(yán)重危害人們的生命健康。據(jù)統(tǒng)計,全球每年約有4.5億噸糧食因真菌毒素污染而無法食用,造成重大經(jīng)濟損失。因此,農(nóng)產(chǎn)品中真菌毒素污染的監(jiān)管亟需強化。然而,當(dāng)前的真菌毒素大規(guī)模篩查技術(shù)無法滿足快速增長的監(jiān)控需求,且快檢試劑盒一次只能檢測一種毒素,急需研發(fā)一種高靈敏的多種真菌毒素同時快速檢測技術(shù),以實現(xiàn)對農(nóng)產(chǎn)品中真菌毒素污染的高效監(jiān)測。
本研究開發(fā)了一種基于支架蛋白的生物發(fā)光酶聯(lián)免疫分析技術(shù)(Scaffold Assembly-based Bioluminescent Enzyme Immunoassay, SA-BLEIA)。通過構(gòu)建支架蛋白-接頭蛋白融合蛋白、納米抗體及熒光素酶-連接多肽融合蛋白,實現(xiàn)了納米抗體與熒光素酶多組分、不同摩爾比的共價偶聯(lián);利用高濃度熒光素酶-納米抗體摩爾比偶聯(lián)形成的免疫聚合體,分別實現(xiàn)了對黃曲霉毒素B1(AFB1)和赭曲酶毒素A(OTA)的快速、低成本和高靈敏檢測;通過構(gòu)建AFB1和OTA特異性納米抗體與熒光素酶同時偶聯(lián)的免疫聚合體,實現(xiàn)了一套試劑對兩種真菌毒素的高靈敏、同時檢測;進一步的玉米、小麥等實際樣品檢測實驗證實了SA-BELIA能夠準(zhǔn)確定量谷物樣品中的AFB1和OTA。本研究創(chuàng)新性地通過支架蛋白組裝技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)免疫分析方法缺乏多重檢測能力的缺陷,證明了支架蛋白組裝在可定制、可拓展和多重免疫分析技術(shù)開發(fā)中的重要作用,對實現(xiàn)農(nóng)產(chǎn)品中真菌毒素及其他食品和環(huán)境污染物的高效監(jiān)測具有重要理論意義和應(yīng)用價值。
該研究得到國家自然科學(xué)基金、廣東省自然科學(xué)基金、廣州市基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究項目等多個科研項目的資助。【
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