人CD30配體(sCD30 L)ELISA試劑盒
英文名:Human sCD30 L ELISA Kit
運(yùn)輸方式:低溫運(yùn)輸,含稅含運(yùn)費(fèi)
靈敏度:具體請(qǐng)查看說(shuō)明書(shū).
產(chǎn)品用途: 科研ELISA檢測(cè)試劑盒.提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù).
標(biāo)本收集注意事項(xiàng):
1) 在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。
2) 我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),對(duì)收集后及時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。
人CD30配體(sCD30 L)ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
卡邁舒生物ELISA(酶聯(lián)免疫)試劑盒服務(wù)承諾:
一、產(chǎn)品質(zhì)量保證,有問(wèn)題免費(fèi)包換
二、提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)(提供來(lái)樣檢測(cè)服務(wù),zui大限度實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性節(jié)約您的實(shí)驗(yàn)時(shí)間)
三、提供全程技術(shù)指導(dǎo)。
標(biāo)本收集:
1. 收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原,無(wú)內(nèi)毒素試管。
2. 血漿抗凝劑*使用EDTA。避免使用溶血,高血脂標(biāo)本。
3. 標(biāo)本應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。
4. 標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次使用量分裝,凍存于-20℃,-70℃電冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融,3-6月內(nèi)檢測(cè)。
5. 如果您的樣本中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建 議做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù))。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)分裝后,將其放在-20~-70℃貯存。
2. 濃縮*化抗體,濃縮酶結(jié)合物體積小,運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,會(huì)使液體沾到管壁 或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)用手甩幾下或1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。取用前,請(qǐng)用移液器小心吹打4-5次使溶液混勻。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后 再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過(guò)50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 若需要分次使用標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)按照每一次用量分裝,將其放在-20~-70℃貯存。避免反復(fù)凍 融。
5. 不同批號(hào)的試劑盒組份不能混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
6. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無(wú)微量振蕩器,可在反應(yīng)前手工輕輕敲擊酶標(biāo)板框混勻。
7. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。
8. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試 驗(yàn)結(jié)果。
9. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí), 請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
檢測(cè)前準(zhǔn)備工作:
1. 請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,以平衡至室溫。
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:20)。未用完的放回4℃。
3. 標(biāo)準(zhǔn)品: 加入標(biāo)準(zhǔn)品/標(biāo)本稀釋液0.5ml至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中,靜置15分鐘,待其充分溶解后,輕輕混勻(濃度為1000 pg/ml)。然后根據(jù)需要進(jìn)行稀釋。(建議標(biāo)準(zhǔn)曲線使用以下濃度: 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.6、0 pg/ml)。復(fù)溶標(biāo)準(zhǔn)品原液(1000 pg/ml)若未用完請(qǐng)分裝后放入-20℃以下電冰箱內(nèi)保存,保存兩個(gè)月。已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品請(qǐng)廢棄。
4. *化抗體工作液:按當(dāng)次試驗(yàn)所需要得用量,使用前20分鐘,以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體(1:30)成工作濃度。當(dāng)日使用。若實(shí)驗(yàn)次數(shù)過(guò)多導(dǎo)致*化 抗體量不足,可向我們公司單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)*化抗體。(須提供抗體批號(hào))
5. 酶結(jié)合物工作液:按當(dāng)次試驗(yàn)所需要得用量,使用前20分鐘,以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃 縮酶結(jié)合物(1:30) 成工作濃度。當(dāng)日使用。若實(shí)驗(yàn)次數(shù)過(guò)多導(dǎo)致濃縮酶結(jié)合物量不足, 可向我們公司單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)濃縮酶結(jié)合物。(須提供酶結(jié)合物批號(hào))
洗滌方法:
1. 自動(dòng)洗板機(jī):要求注入的洗滌液為350ul,注入與吸出間隔15-30秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350ul,靜置30秒后甩盡液體,在厚迭吸水紙上拍干。洗板5次。
操作步驟:
1.從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗(yàn)所需板條,未用的板條和干燥劑請(qǐng)放回鋁箔袋內(nèi)壓 實(shí)自封條,密封口袋,放回4℃。
2.空白孔加標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本稀釋液,其余相應(yīng)孔中加標(biāo)本或不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品(100ul/孔),用封板膠紙封住反應(yīng)孔,36℃孵箱孵育90分鐘。
3.提前20分鐘準(zhǔn)備*化抗體工作液。
4.洗板5次。
5.空白孔加*化抗體稀釋液,其余孔加入*化抗體工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔,36℃孵箱孵育60分鐘。
6.提前20分鐘準(zhǔn)備酶結(jié)合物工作液。避光室溫(22-25 ) ℃ 放置。
7.洗板5次。
8.空白孔加酶結(jié)合物稀釋液,其余孔加入酶結(jié)合物工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔,36℃孵箱,避光孵育30分鐘。
9.打開(kāi)酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序。
10.洗板5次。
11.加入顯色底物(TMB)100ul/孔,避光36℃孵箱,避光孵育15分鐘。
12.加入終止液100ul/孔, 混勻后即刻測(cè)量OD450值(3分鐘內(nèi))。在儀器保存讀數(shù)結(jié)果并打印一份紙質(zhì)結(jié)果。
13.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回電冰箱保存至有效期結(jié)束。
建議保存酶標(biāo)板框,以備下次或者今后試驗(yàn)使用。
結(jié)果判斷:
1. 每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本的OD值應(yīng)減去空白孔的OD值。
2. 手工繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),OD值作縱坐標(biāo),以平滑線連接各標(biāo)準(zhǔn)品的坐標(biāo)點(diǎn)。通過(guò)標(biāo)本的OD值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。
3. 若標(biāo)本OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測(cè),計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
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