小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒
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ELISA實驗影響因素:
ELISA質(zhì)量保證是一個復(fù)雜的過程,許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測的質(zhì)量
1.方法學(xué)的影響:ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。
2.試劑因素:不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量**,即使是通過批檢的項目其檢測結(jié)果也會存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程,并且能保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
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