人IL-1F7/FIL1ζ ELISA試劑盒
三、抗原或抗體檢測(cè)的方法
由于各種檢測(cè)方法中所用的抗原性狀不同,出現(xiàn)結(jié)果的現(xiàn)象也不同。zui廣泛應(yīng)用方法有下述幾種:
(一)沉淀反應(yīng)
可溶性抗原與抗體結(jié)合,在兩者比例合適時(shí),可形成較大的不溶性免疫復(fù)合物。在反應(yīng)體系中出現(xiàn)不透明的沉淀物,這種抗原抗體反應(yīng)稱為沉淀反應(yīng)(precipitation neaction)。
1.環(huán)狀沉淀試驗(yàn) 先將含抗體的未稀釋的免疫血清加到直徑小于 0.5cm的小試管底部。將稀釋的含有可溶性抗原的材料重疊于上,讓抗原與抗體在兩液體的界面相遇,形成白色免疫復(fù)合物沉淀環(huán),故名為環(huán)狀沉淀試驗(yàn)(ring precipitationtest),此法簡(jiǎn)便易行,需用材料較多是其缺點(diǎn)。
2.單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn) 單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)(singleimmunodiffusion)是在凝膠中進(jìn)行的沉淀反應(yīng)。將抗體混入加熱溶解的瓊脂中,傾注于玻片上,制成含有抗體的瓊脂板,在適當(dāng)位置打孔,將抗原材料加入瓊脂板的小孔內(nèi),讓抗原從小孔向四周的瓊脂中擴(kuò)散,與瓊脂中的抗體相遇形成免疫復(fù)合物。當(dāng)復(fù)合物體積增加到一定程度時(shí)停止擴(kuò)散,出現(xiàn)以小孔為中心的圓形沉淀圈,沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度成正相關(guān)。本方法簡(jiǎn)便,易于觀察結(jié)果,可測(cè)定抗原的靈敏度(zui低濃度)約為10~20μg/ml,常用于定量測(cè)定人或動(dòng)物血清IgG、IgM、IgA和C3等,其缺點(diǎn)是需1~2天才能看結(jié)果
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