ABI 7500 Fast /7500實時熒光定量PCR系統(tǒng)
ABI7500 實時熒光定量PCR儀
1. 五色熒光檢測,應(yīng)用更廣泛全面,包括:基因表達分析,病原體jd定量分析,SNP基因型分析以及以陽性內(nèi)對照為基礎(chǔ)的陽性/陰性結(jié)果判定
2. 新型光路設(shè)計支持更多的熒光標(biāo)記檢測,包括:FAM™/SYBR® Green I, VIC®/JOE, NED™/ TAMRA™/ Cy3®, ROX™/Texas Red®,和Cy5®;
3. 更好的激發(fā)光源設(shè)計使長波長紅色熒光的檢測靈敏度大大提高
4. 強大而靈活的反應(yīng)板設(shè)置指南軟件使反應(yīng)板設(shè)置非常方便,*的實驗結(jié)果顯示與自動分析工具使實驗數(shù)據(jù)的分析處理更簡單直觀
5. 型半導(dǎo)體熱循環(huán)系統(tǒng)支持96孔板和單一0.2ml反應(yīng)管。
6. 將來可以升級至超速定量PCR反應(yīng)模式,大大縮短定量PCR反應(yīng)時間
7. 體積小,采用手提電腦或臺式電腦,適用于任何空間的實驗室。
ABI 7500 Fast /7500實時熒光定量PCR系統(tǒng)
是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。7500將PCR熱循環(huán),熒光檢測和各種應(yīng)用分析軟件結(jié)合在一起,可以動態(tài)觀察PCR每一循環(huán)各反應(yīng)管中PCR擴增產(chǎn)物逐漸增加的情況。PCR實驗結(jié)束后可以馬上得到定量結(jié)果,無需凝膠電泳分析,無需純化PCR產(chǎn)物,無需進行任何實驗操作。7500型實時熒光定量PCR儀采用96孔反應(yīng)板或單個及8聯(lián)管,反應(yīng)體積25-100微升,實驗可以在不到2小時內(nèi)結(jié)束。
與其他人工基因定量分析方法如Northern blotting or RNase-protection assays相比,7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)具有時間省,靈敏度高,準(zhǔn)確性好和線性范圍寬等優(yōu)點。
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)由實時定量PCR技術(shù)—美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司于2004年1月推出,它質(zhì)量優(yōu)異,實驗結(jié)果準(zhǔn)確可信,性能價格比極其*。
ABI7500快速型實時定量PCR儀主要應(yīng)用:
實時定量PCR應(yīng)用廣泛,包括基于相對定量分析的基因表達分析,以標(biāo)準(zhǔn)曲線為基礎(chǔ)的病原體jd定量分析,定性的PCR擴增后核酸序列的SNP基因型分析,以及以陽性內(nèi)對照為基礎(chǔ)的陽性/陰性結(jié)果判定
快速熱循環(huán)
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)模式采用25-100微升反應(yīng)體積,可以采用96孔板或單管/8聯(lián)管進行實驗反應(yīng)。另外7500還可以升級為快速熱循環(huán)樣品基座,該升級為選購件,由AB公司工程師負責(zé)安裝??焖贌嵫h(huán)樣品基座采用新型96孔反應(yīng)板,這種反應(yīng)板的管內(nèi)液體上方的空間較小,可以支持5-30微升反應(yīng)體積的實驗。采用樣品基座升級后的7500,新型96孔反應(yīng)板和新型快速熱循環(huán)定量PCR預(yù)混試劑,實時定量PCR實驗可以在40分鐘內(nèi)完成,實驗效果與標(biāo)準(zhǔn)2小時模式*一致。
實時定量PCR系統(tǒng)分析軟件:
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)軟件采用Windows XP®操作系統(tǒng),進行儀器控制,數(shù)據(jù)收集和數(shù)據(jù)分析,軟件功能強大,界面友好,包括如下特色:
1. 反應(yīng)板設(shè)置指南,使實驗設(shè)計非常簡單,即使是復(fù)雜的多重定量實驗也是如此。
2. 擴增反應(yīng)曲線的實時監(jiān)測
3. 自動設(shè)定熒光基線,自動計算熒光閾值使實驗結(jié)果分析大大簡化
4. 采用標(biāo)準(zhǔn)曲線進行靶基因的jd定量
5. 基因表達相對定量軟件提供強大的結(jié)果分析顯示,可以自動將多達10塊96孔板基因表達實驗的數(shù)據(jù)同時分析,并自動去除無關(guān)項數(shù)據(jù),該軟件為選購件
6. 自動SNP分型軟件以直觀的圖表輸出分型結(jié)果并自動進行分型質(zhì)量評分
7. 解離曲線數(shù)據(jù)采集操作簡單觀察方便,可以在儀器運行時觀察解離曲線數(shù)據(jù)
8. 觀察實時擴增曲線時可以非常方便的標(biāo)定所對應(yīng)的樣品孔位置
9. 光源使用時間監(jiān)測及儀器系統(tǒng)自我診斷程序
熒光信號檢測:
ABI7500快速型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的全部96個樣品孔采用同一鹵鎢燈作為光源,鹵鎢燈光通過五色光源濾光片后激發(fā)每一個分析樣品。鹵鎢燈光源增加光源濾光片后改善了長波長紅色熒光標(biāo)記的激發(fā)效果,可以大大提高紅色熒光檢測的靈敏度和定量分析的準(zhǔn)確性。激發(fā)后的熒光再通過五色熒光濾光片到達CCD照相機檢測信號。五色熒光濾光片能夠有效地分辨包括:FAM™/SYBR® Green I, VIC®/JOE, NED™/TAMRA™/ Cy3®, ROX™/Texas Red®和Cy5®在內(nèi)的多種熒光染料。
儀器技術(shù)指標(biāo)
熱循環(huán)系統(tǒng) 新型半導(dǎo)體,96個樣品孔,可以升級到96孔快速熱循環(huán)樣品基座
光學(xué)系統(tǒng) 5色激發(fā)光源,5色熒光濾光片和超低溫CCD成像系統(tǒng)
Run Variables 標(biāo)準(zhǔn)運行模式 快速運行模式
定量PCR運行時間 2 小時 <40分鐘
樣品管類型 96孔板或0.2-mL單管 96孔板
反應(yīng)體積 25–100 微升 5–30微升
安裝技術(shù)指標(biāo):
在使用TaqMan®的RNA合成酶P儀器安裝板的情況下,7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)能夠區(qū)分5,000和10,000模板拷貝數(shù),其置信度高達99.7%
儀器性能:
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)經(jīng)過驗證可以達到如下性能目標(biāo):
• 9個數(shù)量級的線性范圍
• 可以檢測50ul反應(yīng)體積單一報告熒光TaqMan實驗中僅10個起始拷貝數(shù)的模板,其置信度高達99.7%
試劑與消耗品:
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)可使用全套定量PCR試劑與消耗品,包括:TaqMan® PCR通用預(yù)混試劑, SYBR® Green I預(yù)混試劑,96孔反應(yīng)板及0.2ml反應(yīng)管。
TaqMan® Assays-on-Demand™ and TaqMan® Assays-by-Design™應(yīng)用試劑盒:
美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司為7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)提供各種配套的TaqMan定量PCR應(yīng)用試劑盒,這些試劑盒均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,可以拿來直接使用。
試劑盒內(nèi)容 具體應(yīng)用目的
試劑盒類型
基因表達試劑盒 SNP基因分型試劑盒
TaqMan® Assays by Design™ Products(代客設(shè)計合成) 有 有
TaqMan® Assays-on-Demand™ Products(成套標(biāo)準(zhǔn)試劑) 有 有
基因組類型 試劑盒的種類總數(shù)
人基因 >21,500種 >156,500種
小鼠基因 >13,000種 N/A
大鼠基因 >3,500種 N/A
儀器主機和電腦的大小重量:
大小 7500 主機 手提式電腦 臺式電腦
寬 34 cm (13.39 in.) 32 cm (12.4 in.) 18 cm (7.1 in.)
深 45 cm (17.72 in.) 26 cm (10.1 in.) 45 cm (17.6 in.)
高 49 cm (19.29 in.) 3 cm (1.2 in. closed)42 cm (16.7 in.)
重量 34 kg (75 lb) 2.1 kg (4.7 lb) 32 kg (70 lb)