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負壓病房，PCR實驗室

一、什么是負壓病房？

負壓病房是指病房內(nèi)的氣壓低于病房外的氣壓的一種病房。傳染類疾病負壓病房一般由衛(wèi)生間、病室、緩沖間三部分組成。

負壓病房是搶救非典病人時的一個重要條件，是WHO中特別規(guī)定強調(diào)過的，但是這種病房的制造水平要求較高，我國很很多醫(yī)院都無法達到這個標準。

二、負壓病房有什么作用？

1、防止傳染。

這個功能是利用負壓原理來實現(xiàn)的。此原理的應用可以很好地隔離病原微生物，并且可以將病房內(nèi)患者呼出的含有病原微生物的氣體做到良好消毒處理，只有在這些含有病原微生物的氣體被安全處理之后才會被排放到大氣當中，從而達到切斷病毒傳播途徑。

2、保護醫(yī)護人員工作安全。

這個功能是通過特別設計的氣流組織和通風換氣機構來實現(xiàn)的。這些特殊構造可以稀釋病房內(nèi)的病原微生物濃度，并使醫(yī)護人員處于上風段，從而達到保護醫(yī)護人員工作安全的目的。

正是因為負壓病房用途的特殊性，所以，負壓病房的建造是極其嚴格高標準的。負壓病房還可以根據(jù)需要控制病房內(nèi)部的溫度、濕度、空氣潔凈度等相關參數(shù)，對于患者的治療是非常有利的。

負壓病房，PCR實驗室

pcr實驗室建設四要素

1 試劑準備區(qū)

用于試驗試劑的準備。該區(qū)域為正壓，目的是防止污染物質(zhì)溢入。該區(qū)域內(nèi)部又可分為3個區(qū)域：普通提取試劑的準備區(qū)、PCR試劑準備區(qū)和PCR主反應液準備區(qū)。在普通提取試劑的準備區(qū)內(nèi)準備一些樣品核酸提取時所需的裂解液、提取液等；PCR試劑準備區(qū)用于PCR試劑的制備和保存。例如準備引物、探針等PCR試劑。為了防止交叉污染，避免反復冷凍和解凍，試劑存貯溶液應該被平均為小的工作體積，儲存在這個房間以備后用：PCR主反應液準備區(qū)將進行主反應混合液(除了樣品。所有PCR所需試劑的混合)添加到PCR管的操作。重要提示：不能將其它房間的材料(包括擴增、模板和目標核酸或陽性對照、供應品、或設備)帶進試劑準備區(qū)。

2 樣品準備區(qū)

該區(qū)域無壓力設置要求。該區(qū)域是用于對樣品進行分樣，將樣品進行研磨、粉碎、勻漿的區(qū)域。由于在這些粉碎、研磨和勻漿處理過程中會產(chǎn)生氣溶膠，因此，存在陽性樣品污染后續(xù)操作的可能性。該區(qū)域與后面的區(qū)域應嚴格隔離，應放在與后面的三個區(qū)域隔開的獨立的房間中。在樣品準備區(qū)內(nèi)還可設立一個的封閉區(qū)或房間用于樣品的接收和儲存。這個房間可以放置冰箱用于樣品儲存，應該和樣品準備區(qū)其它區(qū)域隔離開。樣品準備區(qū)域的人員不得進入試劑準備區(qū)。

3 核酸提取區(qū)

核酸提取區(qū)是進行樣品核酸提取的區(qū)域。該區(qū)域為負壓，目的是防止核酸溢出造成污染。樣品準備區(qū)又包括從樣品中進行核酸提取和純化的區(qū)域以及將核酸加到包含PCR主反應混合液管中的操作區(qū)域。添加完樣品后，PCR管的蓋子要盡可能快地蓋好。使用PCR板和膠蓋時，陽性對照和含目標序列的樣品要與待測樣本分開操作，以避免模板添加時造成交叉污染
重要提示：這個房間里的一切物品不得帶人試劑準備區(qū)。

4 擴增和產(chǎn)品檢測區(qū)

該區(qū)域是用來進行PCR擴增和PCR分析的。PER儀放置在這個區(qū)域。房間保持負壓，目的是防止核酸溢出。在該區(qū)域人員一定要一直穿戴工作服和手套，在離開房間前脫去，防止擴增子污染其它地點。所有用于擴增和產(chǎn)品檢測的設備要用于這個房間。PCR分析]二作也設置在該區(qū)域，例如：酶切、測序、克隆等，但實驗室應盡可能把這些活動分隔在不同區(qū)域或不同房間。以降低擴增產(chǎn)物的污染風險。如果沒有條件在該區(qū)域設立負壓，此區(qū)域必須建立排風裝置。